重組膠原蛋白成分檢測(cè),“方法學(xué)驗(yàn)證”是把金鑰匙
隨著護(hù)膚場(chǎng)景及需求的日益增長(zhǎng),消費(fèi)者對(duì)護(hù)膚品的關(guān)注點(diǎn)已從基礎(chǔ)護(hù)理逐步轉(zhuǎn)向功效實(shí)現(xiàn),產(chǎn)品實(shí)際有效性也更受大眾關(guān)注。重組膠原蛋白是采用合成物學(xué)方法制造的一類生物活性成分,近些年來在敷料和護(hù)膚品等領(lǐng)域應(yīng)用越來越廣泛。近期,圍繞重組膠原蛋白成分檢測(cè)的方法與結(jié)果可信度引發(fā)了廣泛討論,眾多專業(yè)人士自發(fā)選品檢測(cè),檢測(cè)方法各有論點(diǎn)。那么,究竟如何科學(xué)檢測(cè),其結(jié)果才具有足夠的科學(xué)說服力和行業(yè)公信力?
多方權(quán)威深入探討
揭示重組膠原蛋白成分檢測(cè)核心難題
5月30日,中國(guó)生物工程學(xué)會(huì)科創(chuàng)中國(guó)工作委員會(huì)聯(lián)合昌平合成生物制造轉(zhuǎn)化加速中心舉辦了“復(fù)雜基質(zhì)中重組膠原蛋白檢測(cè)方法”研討會(huì)。會(huì)中,生物醫(yī)藥、分析檢測(cè)、材料科學(xué)等多領(lǐng)域?qū)<揖劢箯?fù)雜基質(zhì)中重組膠原蛋白的分離與純化技術(shù)挑戰(zhàn)、高靈敏度及高特異性檢測(cè)方法的開發(fā)與驗(yàn)證、標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)體系的建立與行業(yè)監(jiān)管需求等主題,解析技術(shù)難點(diǎn),分享實(shí)踐經(jīng)驗(yàn),并為檢測(cè)技術(shù)的優(yōu)化與相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的制定提供建議。
圖: “復(fù)雜基質(zhì)中重組膠原蛋白檢測(cè)方法”研討會(huì)
國(guó)家蛋白質(zhì)科學(xué)中心研究員賈辰熙表示,化妝品中的重組膠原蛋白檢測(cè)相較于敷料類醫(yī)療器械和生物樣本更為復(fù)雜。化妝品中添加了植物提取物、蛋白質(zhì)、多糖、脂類、表面活性劑及色素等多種成分,會(huì)嚴(yán)重干擾膠原蛋白信號(hào),導(dǎo)致檢測(cè)時(shí)其信號(hào)較弱。同時(shí),化妝品中膠原蛋白添加量通常較低,對(duì)低濃度物質(zhì)進(jìn)行定量檢測(cè)難度大。
成分檢測(cè)沒有“萬能鑰匙”
方法學(xué)驗(yàn)證是關(guān)鍵
目前,針對(duì)復(fù)雜基質(zhì)中重組膠原蛋白的檢測(cè)方法尚未出臺(tái)國(guó)家統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。中國(guó)科學(xué)院過程工程研究所研究員張貴鋒介紹,蛋白檢測(cè)方法主要有凱氏定氮法、雙縮脲法、考馬斯亮藍(lán)法、福林酚法、BCA法及特征多肽法等。
圖:張貴鋒教授做《復(fù)雜基質(zhì)樣品中重組膠原蛋白的檢測(cè)方法》主題報(bào)告
對(duì)于不同的檢測(cè)方法,與會(huì)嘉賓紛紛表示,不同的檢測(cè)方法各有特點(diǎn),均有其適配的應(yīng)用場(chǎng)景,無關(guān)新舊,關(guān)鍵是要根據(jù)不同基質(zhì),建立樣品前處理方法,有效排除基質(zhì)的干擾,選擇和建立針對(duì)復(fù)雜基質(zhì)的檢測(cè)方法,并通過方法學(xué)驗(yàn)證其檢出限、定量限、線性、精密度、準(zhǔn)確性及檢測(cè)回收率。
清華大學(xué)化學(xué)系教授、中國(guó)科學(xué)院院士李景虹解釋說,復(fù)雜基質(zhì)中重組膠原蛋白的分子檢測(cè)存在降解過程復(fù)雜等難點(diǎn),不能選用單一的檢測(cè)方法,需根據(jù)不同蛋白的差異性選擇相應(yīng)的檢測(cè)方法,并對(duì)不同類型重組膠原蛋白的不同氨基酸序列、結(jié)構(gòu)包括動(dòng)態(tài)變化和相互作用進(jìn)行研究和驗(yàn)證。
中國(guó)食品藥品檢定研究院研究員徐麗明介紹,重組膠原蛋白產(chǎn)品中的復(fù)雜基質(zhì)是影響成分檢測(cè)的重要因素。現(xiàn)行的標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)方法主要針對(duì)純蛋白質(zhì)樣品,測(cè)定方法在復(fù)雜基質(zhì)中進(jìn)行套用時(shí),需考慮基質(zhì)影響,做好樣品前處理方法研究和驗(yàn)證?!爱?dāng)復(fù)雜基質(zhì)導(dǎo)致重組膠原蛋白成分提取困難時(shí),需要研究基質(zhì)存在情況下的前處理方法,并確保定量用標(biāo)品和供試品是相同的檢測(cè)條件(基質(zhì)環(huán)境),如基質(zhì)加標(biāo)的方式,且需通過多種方法進(jìn)行相互驗(yàn)證?!?/p>
北京師范大學(xué)化學(xué)學(xué)院教授閆東鵬指出,為了排除干擾,提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性,需要提供重組膠原蛋白產(chǎn)品前處理的方法,根據(jù)不同應(yīng)用場(chǎng)景、不同研究體系,采用不同方法進(jìn)行優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)。
針對(duì)復(fù)雜基質(zhì)中重組膠原蛋白的檢測(cè)方法,徐麗明建議,可以采用多種方法進(jìn)行考察,比如雙縮脲法和氨基酸法等,但是也需進(jìn)行充分驗(yàn)證?!半p縮脲法是在行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)里列出的一個(gè)方法,但是在復(fù)雜基質(zhì)里使用要進(jìn)行充分的方法學(xué)驗(yàn)證。氨基酸法是把重組膠原蛋白水解成氨基酸,存在氨基酸水解效率的問題,還有檢測(cè)器靈敏度的問題,同樣需要進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證,另外還要考慮如何去除復(fù)雜基質(zhì)的干擾問題。”
她強(qiáng)調(diào),只有建立了方法學(xué)驗(yàn)證后的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)才能確保檢測(cè)結(jié)果的可信性。
成分檢測(cè)亟需標(biāo)準(zhǔn)
共促行業(yè)有序發(fā)展
值得關(guān)注的是,對(duì)重組膠原蛋白進(jìn)行準(zhǔn)確檢測(cè)是一個(gè)高度復(fù)雜的過程,特別是在護(hù)膚品成分這類“復(fù)雜基質(zhì)”中,未經(jīng)完整鏈路的檢測(cè)驗(yàn)證,其數(shù)據(jù)往往缺乏參考價(jià)值。 正因如此,行業(yè)亟需凝聚多方力量,共同推動(dòng)科學(xué)、統(tǒng)一的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的建立與出臺(tái),有效規(guī)避因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)缺失而導(dǎo)致的功效成分含量不明確等問題,保障消費(fèi)者權(quán)益,并最終助力重組膠原蛋白產(chǎn)業(yè)健康、可持續(xù)發(fā)展。
*數(shù)據(jù)引自新華網(wǎng)報(bào)道研討會(huì)專家共識(shí)
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